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GIBCO胎牛血清的更换技巧分享
  • 发布日期:2019-08-05      浏览次数:44
    •    GIBCO胎牛血清的更换技巧分享
        GIBCO胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛,显然,胎牛血清是品质较高,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。
        GIBCO胎牛血清是细胞培养中用量较大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有较为重要的功能:提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用,起酸碱度缓冲液作用。GIBCO胎牛血清还是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源,并提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。除此之外,在细胞消化过程中提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
        细胞在一个批次的血清中生长正常时,如果更换不同来源或不同批次的血清,会导致细胞生长的不适应,出现细胞增殖缓慢等情况,属于正常现象。更换不同来源或不同批次的血清时出现的细胞生长不适应和血清的品质无关。对于新来源或新批次的血清,通常细胞适应1-2代后就会恢复正常的生长。
        更换GIBCO胎牛血清的技巧:
        a.不同来源或不同批次血清的更换:在一个批次的血清快使用完毕,需更换使用不同来源或不同批次的血清时,宜让细胞有一个逐步适应新血清的过程,这样就几乎不会因为更换血清而影响细胞的生长状态。具体的方法是,在初始使用旧批次血清的情况下,逐渐增加不同来源或不同批次血清的比例,例如把不同来源或不同批次血清的比例逐步调整为0%、30%、60-70%、100%。这样经过约3代细胞的逐渐适应,细胞通常会在新来源或新批次的血清中生长良好。
        b.从胎牛血清更换成新生牛血清:有的细胞是可以用新生牛血清培养的。如果之前是使用GIBCO胎牛血清的但是想更换为新生牛血清培养,也需要让细胞有一个逐步适生牛血清的过程。例如把新生牛血清的比例逐步调整为0%、30%、60-70%、100%。对于不太确定是否适合新生牛血清培养的细胞,可以尝试参考a.

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